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組織固定液的制備方法,知道的人少之又少!

更新時間:2023-04-10   點擊次數:2790次
  組織固定液是一種用于固定生物組織的液體,通常用于制備組織切片或制備組織樣本以進行顯微鏡分析。常見的成分是甲醛和乙醇,它們可以固定細胞和組織中的蛋白質和核酸,防止它們在處理和保存期間變性或降解。此外,其他成分也可能被添加到組織固定液中以達到特定的目的。
 
  下面將對常用的組織固定液的制備方法進行簡要的分析:
 
  1.甲醛固定液制備方法
 
  甲醛固定液是常用的組織固定液之一。制備方法如下:
 
  (1)將甲醛(37%)加入PBS緩沖液中,配制成4%的甲醛溶液;
 
  (2)將甲醛溶液加熱至60℃,然后加入適量的PIPES(pH7.2)緩沖液并混合均勻;
 
  (3)調整pH值至7.2,加入適量的氯化鈉和EDTA,混合均勻。
 
  2.石蠟固定液制備方法
 
  石蠟固定液適用于石蠟嵌入組織切片。它的制備方法如下:
 
  (1)將甲醛、異丙醇和氯仿混合在一起;
 
  (2)將混合液加入石蠟中,并用石蠟溶劑將其溶解;
 
  (3)將組織樣品置于石蠟中,不斷震動以充分浸泡,并在微波爐中進行熱處理;
 
  (4)將組織樣品懸浮在石蠟中,以便于切片和觀察。
 
  3.乙醇固定液制備方法
 
  乙醇固定液是另一種常用的組織固定液,其制備方法如下:
 
  (1)用PBS緩沖液將70%乙醇稀釋為50%乙醇溶液;
 
  (2)在肝素化管中滴加適量的50%乙醇溶液;
 
  (3)將反應組織樣本放入管中,將其浸泡在50%乙醇液中,并用肝素化管封住。
 
  總之,不同的固定液適用于不同類型的生物試樣,并有不同的操作步驟。選擇合適的固定液并在正確的條件下操作是制備高質量組織切片或組織樣本的關鍵。
 

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