一路向西在线观看完整版,77777亚洲午夜久久多人,最近免费中文字幕大全高清10,欧洲美熟女乱又伦

技術(shù)文章您的位置:網(wǎng)站首頁 >技術(shù)文章 >SA-β-gal的檢測(cè)方法,你了解多少?

SA-β-gal的檢測(cè)方法,你了解多少?

更新時(shí)間:2021-09-16   點(diǎn)擊次數(shù):12692次
  生衰退的變化過程。細(xì)胞衰老時(shí),衰老相關(guān)半乳糖苷酶(SA-β-gal)的活性會(huì)顯著增加,故常常檢測(cè)衰老相關(guān)半乳糖苷酶的活性以區(qū)分正常細(xì)胞與衰老細(xì)胞。目前,不同條件或化合物作用細(xì)胞后,常常用衰老相關(guān)半乳糖苷酶檢測(cè)作為細(xì)胞衰老的標(biāo)志之一。
 
  SA-β-gal檢測(cè)方法主要分為細(xì)胞化學(xué)染色法和熒光法。
 
  一、細(xì)胞化學(xué)染色法:SA-βgal在pH6.0時(shí),可將5-溴-4-氯-3-吲哚基β-D-吡喃半乳糖苷水解,產(chǎn)生不溶于水的藍(lán)色物質(zhì)。這種藍(lán)色產(chǎn)物相當(dāng)穩(wěn)定,固定干燥后避光可保存幾個(gè)月。通過計(jì)算總?cè)后w中藍(lán)色細(xì)胞的數(shù)量,可以很容易地確定SA-β-半乳糖苷酶陽性的細(xì)胞比例,即衰老細(xì)胞的比例。但是需要注意的是,在所有細(xì)胞中普遍存在酸性半乳糖苷酶,在pH4.0時(shí)發(fā)揮作用。其實(shí)SA-βgal發(fā)揮作用的最適pH為4.5,但是在pH4.5時(shí),酸性半乳糖苷酶也會(huì)水解底物,因此需要使用SA-βgal次適pH6.0,才能確保藍(lán)色產(chǎn)物是由于SA-βgal的作用而產(chǎn)生的。通常我們使用pH為6.0的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。
 
  二、熒光法:熒光法需要借助另一種底物——C12FDG,不具有熒光,能透過細(xì)胞膜,但被βgal水解后可產(chǎn)生綠色熒光產(chǎn)物。利用流式細(xì)胞儀可檢測(cè)綠色熒光的產(chǎn)生,藉此反映βgal的表達(dá)。因此要想檢測(cè)SA-βgal的活性,需要先將溶酶體堿化至pH6.0。這一過程可使用氯喹或巴弗洛霉素A1等,可降低溶酶體的酸度,使溶酶體堿化至pH6.0。然后向細(xì)胞中加入C12FDG,孵育后制成可供流式分析細(xì)胞懸液,即可利用FC500MPL流式細(xì)胞儀等檢測(cè)SA-βgal的表達(dá)。
 
  SA-β-gal細(xì)胞化學(xué)染色法通常需要半小時(shí)染色,數(shù)小時(shí)甚至一天時(shí)間等待染色完成以觀察和計(jì)數(shù),而熒光法需要4至8小時(shí)處理細(xì)胞,1天內(nèi)可完成計(jì)數(shù)。前者不僅可用于細(xì)胞培養(yǎng)液還可用以組織切片的染色,而且所需試劑和設(shè)備簡(jiǎn)單,而后者更為高效,靈敏,定量更為準(zhǔn)確。因此,根據(jù)實(shí)驗(yàn)的不同目的可選擇不同的檢測(cè)方法。

聯(lián)


色综合久久88色综合天天| 97久久精品人人做人人爽| 淑娟两腿间又痒了| 婷婷伊人久久大香线蕉av| 色综合天天综合网国产成人网 | 国产精品久久久久久爽爽爽床戏| 人妻少妇精品中文字幕av| 久久久久久精品免费免费自慰| 亚洲处破女a片出血| 亚洲日韩V无码中文字幕| 18禁裸乳无遮挡啪啪无码免费 | 欧美mv日韩mv国产网站| jizz国产精品网站| 久久久www成人免费毛片| 国产99在线 | 亚洲| 久久久精品456亚洲影院| 一本一道人人妻人人妻αv| 放荡的丝袜人妻老师| 久久久无码精品亚洲日韩按摩 | 无码欧精品亚洲日韩一区| 少妇一夜三次一区二区| 新番里h肉3d动漫在线观看网站| 国产精品美女久久久久| 日本亲与子乱人妻hd| 插我一区二区在线观看| 波多野结衣网站| 国产老熟妇精品观看| 国产乱人伦真实精品视频| 久久久久久亚洲精品无码| 精品人妻一区二区三区四区在线 | 国产精品va在线播放我和闺蜜| 欧美精品videossex| 日本乱偷互换人妻中文字幕| 丰满人妻中伦妇伦精品app| 又粗又硬又大又爽免费视频播放| 无码熟妇人妻av在线影片软件 | 精品国精品国产自在久国产应用| 中文字幕亚洲无线码在线一区| 我和亲妺婷婷在浴室作爱经过| 久久国产免费观看精品3| 国内大量揄拍情侣在线视频99|